Horseradish peroxidase (HRP) Rapid Coupling Kit

本试剂盒提供一个简单快速偶联方案，专门用于将辣根过氧化物酶（HRP）偶联到含有游离氨基的抗体、蛋白质，多肽或者其它配体上。与传统方法相比，我们的偶联反应具有更高的效率和产量，偶联物更为稳定，并不易脱落。试剂在pH7-9的缓冲液中与伯氨基（-NH2）有效反应，形成稳定的酰胺键。蛋白质，包括抗体，通常在赖氨酸（K）残基的侧链和每个多肽的N末端具有几种伯胺，这些伯胺可用作试剂标记的靶标。

功能与特点：
本试剂盒提供快速标记所需的全套试剂，且试剂易于保存。
100％的回收率，偶联过程2h， 动手时间约5min。
偶联产物不需纯化，且可长期保存。

100μg可用于标记100µg抗体（单抗，多抗）或其他蛋白:

500μg可用于标记500µg抗体（单抗，多抗）或其他蛋白:

1mg可用于标记1mg抗体（单抗，多抗）或其他蛋白:

100μg使用方法：
1、在待标记的抗体或蛋白(浓度范围为3-10mg/mL)中加入试剂A (待标记蛋白与试剂A的体积比为9:1），反复吹打混合均匀，避免产生气泡；
2、继续在待标记的抗体或蛋白中加入试剂B (5µL），反复吹打混合均匀；避免产生气泡；
3、室温避光混匀反应1个小时；
4、继续加入试剂C (10µL），反复吹打混合均匀；避免产生气泡。
注：由于蛋白或抗体不同， 试剂C的加入量也可根据具体情况适量调整。
5、室温避光混匀反应1个小时。

500μg使用方法
1、在待标记的抗体或蛋白(浓度范围为3-10mg/mL)中加入试剂A (待标记蛋白与试剂A的体积比为9:1），反复吹打混合均匀，避免产生气泡；
2、继续在待标记的抗体或蛋白中加入试剂B (25µL），反复吹打混合均匀；避免产生气泡；
3、室温避光混匀反应1个小时；
4、继续加入试剂C (50µL），反复吹打混合均匀；避免产生气泡；
注：由于蛋白或抗体不同， 试剂C的加入量也可根据具体情况适量调整。
5、室温避光混匀反应1个小时。

1mg使用方法
1、在待标记的抗体或蛋白(浓度范围为3-10mg/mL)中加入试剂A (待标记蛋白与试剂A的体积比为9:1），反复吹打混合均匀，避免产生气泡；
2、继续在待标记的抗体或蛋白中加入试剂B (50µL），反复吹打混合均匀；避免产生气泡；
3、室温避光混匀反应1个小时；
4、继续加入试剂C (100µL），反复吹打混合均匀；避免产生气泡；
注：由于蛋白或抗体不同， 试剂C的加入量也可根据具体情况适量调整。
5、室温避光混匀反应1个小时。

1、本试剂对水份敏感，在开瓶前，需将各组分小瓶完全平衡至室温，以避免容器内的水份冷凝。

2、待偶联的抗体/蛋白缓冲液及浓度要求：抗体/蛋白应保存于10mM的磷酸盐缓冲液（1xPBS，pH 7.2-7.4）中，推荐的浓度范围为3-10mg/mL，缓冲液中不能含有氨基成分，避免与偶联剂发生竞争反应，影响偶联效果：具体包括伯胺（如Tris、甘氨酸、铵盐、EDTA），蛋白稳定剂（如BSA应<0.1%、明胶、甘油应<20%,）, 及防腐剂，如叠氮钠等。若样品中含有可能干扰标记的物质，建议用PBS置换缓冲液，并浓缩至推荐浓度。

3、反复冻融对本试剂影响较大，任何未使用完的解冻试剂需丢弃，不可再次使用。

4、偶联产物的保存：若抗体/蛋白标记物的最终浓度小于0.5mg/mL，可考虑浓缩或添加稳定剂，存储于2-8°C，效期3个月。若需长期储存，偶联产物可冻干，或添加50%甘油后，储存于-20°C。