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CD138 Nanobeads, human（RUO）

CD138 Nanobeads, human（RUO）

Catalog Number: S0K0016 Reactivity: Human Conjugation: Brand: Starter
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$500 USD
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Product Details

Product Specification


Reactivity Human
Stability & Storage

避光保存于2–8℃，不可冻存。

Background

CD138 NanoBeads专为从人外周血单个核细胞、骨髓或淋巴组织中分离浆细胞而研发。CD138又称多配体蛋白聚糖-1（syndecan-1），表达于正常及恶性人浆细胞表面，是鉴定浆细胞的通用标志物。CD138同时表达于内皮细胞基底外侧膜、胚胎间充质细胞、血管平滑肌细胞及神经细胞。在小鼠体内，CD138除表达于浆细胞外，还表达于骨髓中的B细胞前体细胞。

Protocol

以S Separation Column为例

步骤

操作方法

剂量 / 时间

磁性标记

1

计数细胞总数

—

2

细胞悬液400×g离心7分钟，完全吸弃上清

400×g,7 min

3

每1×10⁷细胞加90 μL缓冲液重悬

Note: 缓冲液用量根据样品体积等比例调整

重悬细胞

4

每1×10⁷细胞加10 μL CD138 NanoBeads

Note：细胞量增大时，所有试剂体积按比例同步增加

1×10⁷细胞加 10 μL

5

充分混匀，2–8℃避光孵育15min

孵育15 min

6

每1×10⁷细胞加1 mL缓冲液洗涤，400×g离心7分钟，完全吸弃上清

1×10⁷细胞加1 mL

7

500 μL缓冲液最多重悬1×108细胞

重悬细胞

磁性分选

8

将S型分选柱放入对应磁力分选器磁场中，500μL缓冲液润洗分选柱

润洗分选柱

9

将细胞悬液上样至分选柱，收集流出液（未标记细胞）

—

10

缓冲液洗涤柱子3次，每次500μL，待柱内液体完全流空后再加下一次

3×500 μL缓冲液

11

合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上

—

12

向柱内加入1mL缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞

Note：如需更高纯度，换用新柱重复分选1次

收集目的细胞


以L Separation Column为例

步骤

操作方法

剂量 / 时间

磁性标记

1

计数细胞总数

—

2

细胞悬液400×g离心7分钟，完全吸弃上清

400×g,7 min

3

每1×10⁷细胞加90 μL缓冲液重悬

Note: 缓冲液用量根据样品体积等比例调整

重悬细胞

4

每1×10⁷细胞加10 μL CD138 NanoBeads

Note：细胞量增大时，所有试剂体积按比例同步增加

1×10⁷细胞加 10 μL

5

充分混匀，2–8℃避光孵育15min

孵育15 min

6

每 1×10⁷细胞加1 mL缓冲液洗涤，400×g 离心7分钟，完全吸弃上清

1×10⁷细胞加1 mL

7

500 μL缓冲液最多重悬1×108细胞

重悬细胞

磁性分选

8

将L型分选柱放入对应磁力分选器磁场中, 3 mL缓冲液润洗分选柱

润洗分选柱

9

将细胞悬液上样至分选柱，收集流出液（未标记细胞）

—

10

缓冲液洗涤柱子3次，每次3 mL，待柱内液体完全流空后再加下一次

3×3 mL缓冲液

11

合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上

—

12

向柱内加入5mL缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞

Note：如需更高纯度，换用新柱重复分选1次

收集目的细胞


Picture

Validation Data

采用CD138 Nanobeads、S或L Separation Column及磁性分选器对该单细胞悬液进行CD138⁺细胞去除处理。随后使用PE Mouse Anti-Human CD138 Antibody (S-R553)(STD Cat: S0B5646)进行荧光染色，并圈选活细胞群进行分析。