CD15 Nanobeads, human（RUO）

Catalog Number: S0K0025 Reactivity: Human Conjugation: Brand: Starter

Price:

$450 USD

Size: 1 mL 2 mL

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Product Details

Reactivity	Human
Stability & Storage	避光保存于2–8℃，不可冻存。

CD15 Nanobeads, human旨在从人外周血或组织单细胞悬液中阳性分选或去除 CD15 阳性细胞。CD15抗原表达于中性粒细胞、嗜酸性粒细胞以及髓系谱系的单核母细胞前体细胞，但不表达于嗜碱性粒细胞和淋巴细胞。此外，该抗原也表达于Hodgkin/Reed-Sternberg细胞。

以S Separation Column为例

	步骤	操作方法	剂量 / 时间
磁性标记	1	人外周血裂红后计数细胞总数 Note: 推荐细胞采用AO/PI染色后进行计数	—
	2	细胞悬液400×g离心7分钟，完全吸弃上清	400×g,7 min
	3	每1×10⁷细胞加80 μL缓冲液重悬 Note: 缓冲液用量根据样品体积等比例调整	重悬细胞
	4	每1×10⁷细胞加20 μL CD15 Nanobeads, human Note：细胞量增大时，所有试剂体积按比例同步增加	1×10⁷细胞加 20 μL
	5	充分混匀，2–8℃避光孵育15min	孵育15 min
	6	每1×10⁷细胞加1 mL缓冲液洗涤，400×g 离心7分钟，完全吸弃上清	1×10⁷细胞加1 mL
	7	500 μL缓冲液最多重悬1×10⁸细胞	重悬细胞
磁性分选	8	将S型分选柱放入对应磁力分选器磁场中，500 μL缓冲液润洗分选柱	润洗分选柱
	9	将细胞悬液上样至分选柱，收集流出液（未标记细胞）	—
	10	缓冲液洗涤柱子3次，每次500μL，待柱内液体完全流空后再加下一次	3×500 μL缓冲液
	11	合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上	—
	12	向柱内加入1mL缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞 Note：如需更高纯度，换用新柱重复分选1次	收集目的细胞

以L Separation Column为例

	步骤	操作方法	剂量 / 时间
磁性标记	1	人外周血裂红后计数细胞总数 Note: 推荐细胞采用AO/PI染色后进行计数	—
	2	细胞悬液400×g离心7分钟，完全吸弃上清	400×g,7 min
	3	每1×10⁷细胞加80 μL缓冲液重悬 Note: 缓冲液用量根据样品体积等比例调整	重悬细胞
	4	每1×10⁷细胞加20 μL CD15 Nanobeads, human Note：细胞量增大时，所有试剂体积按比例同步增加	1×10⁷细胞加 20 μL
	5	充分混匀，2–8℃避光孵育15min	孵育15 min
	6	每1×10⁷细胞加1 mL缓冲液洗涤，400×g离心7分钟，完全吸弃上清	1×10⁷细胞加1 mL
	7	500 μL缓冲液最多重悬1×10⁸细胞	重悬细胞
磁性分选	8	将L型分选柱放入对应磁力分选器磁场中，3 mL缓冲液润洗分选柱	润洗分选柱
	9	将细胞悬液上样至分选柱，收集流出液（未标记细胞）	—
	10	缓冲液洗涤柱子3次，每次3 mL，待柱内液体完全流空后再加下一次	3×3 mL缓冲液
	11	合并所有流出液为阴性组分；将分选柱移出磁场，置于收集管上	—
	12	向柱内加入5mL缓冲液，用配套柱塞快速、用力推压，洗脱磁性标记的阳性细胞 Note：如需更高纯度，换用新柱重复分选1次	收集目的细胞

使用CD15 Nanobeads, human、S或L Separation Column及磁性分选器从人外周血中富集或去除CD15+细胞。随后使用APC anti-human CD15 (SSEA-1) Antibody (Clone:HI98)进行荧光染色，并圈选活细胞群进行分析。