Biotin Rapid Coupling Kit

生物素（Biotin）快速偶联试剂盒提供一个简单快速的偶联方案，用于将生物素（Biotin）偶联到含有游离氨基的抗体、蛋白质、多肽或者其它配体上。试剂在pH7-9的缓冲液中与伯氨基（-NH2）有效反应，形成稳定的酰胺键。蛋白质，包括抗体，通常在赖氨酸（K）残基的侧链和每个多肽的N末端具有几种伯胺，这些伯胺可用作试剂标记的靶标。

应用
（1）蛋白（抗体）等快速标记

优势
（1） 灵敏度高，标记效率高；
（2） 提供脱盐柱及使用方案；
（3） 提供标记效率检测方法；
（4）本试剂盒提供快速标记所需的全套试剂，且试剂易于保存。

2mg可用于标记0.5-2mg抗体（单抗，多抗）或其他蛋白:

10mg可用于标记0.5-10mg抗体（单抗，多抗）或其他蛋白:

1. 待偶联的抗体/蛋白缓冲液及浓度要求：抗体/蛋白应保存于10mM的磷酸盐缓冲液（1xPBS，pH 7.2-7.4）中，推荐的浓度范围为2-4mg/mL，缓冲液中不能含有氨基成分，避免与偶联剂发生竞争反应，影响偶联效果：具体包括伯胺（如Tris、甘氨酸、铵盐、EDTA），及蛋白稳定剂（如BSA、明胶）等。若样本中含有可能干扰标记的物质，建议用PBS置换缓冲液，并浓缩至推荐浓度。

2. 对于大多数IgG，在1厘米光程的比色皿中，1mg/mL溶液在280nm处的吸光度约为1.3-1.4，偶联剂在280nm波长处没有明显吸收，因此，生物素标记抗体的浓度(mg/mL)可通过测量透析样品在280nm处的吸光度值除以1.4来计算标记抗体的浓度。

3. 建议偶联产物冷藏保存。如果纯化抗体/蛋白结合物的最终浓度小于1mg/mL，添加牛血清白蛋白(BSA)或其他蛋白稳定剂至浓度1-10mg/mL，可在2-8°C下稳定数月。对于长期储存，标记物溶液可按使用需求分装，并在-20°C下避光冷冻，避免反复冻融。

4. 本试剂盒中加入助溶剂后配制的偶联剂溶液，如果使用不完，请密封放在-20°C保存，一周内可以正常使用，如果超过一周，一个月之内使用，使用里量请酌情加大；超过一个月请不要再使用。

5. 对于分子量小于5KD的小肽分子，可适当提高偶联剂溶液的加样量，以提升偶联效率。

6. 本试剂盒中脱盐柱（>5000 Mr）的使用说明：柱体积8.3mL，洗脱液 3.5mL，重力脱盐：上样量1.0-2.5mL，脱盐效率>98%；离心脱盐：上样量1.75-2.5mL，脱盐效率>90%。

7. 试剂D于2°C -8°C保存有盐类结晶出现，恢复到室温并混匀后结晶消失属正常现象。