{"product_id":"unione-tr-fret-human-vcbvhl-complexbinding-kit-ua086119","title":"UniOne® TR-FRET Human VCB（VHL Complex）Binding Kit","description":"\u003ch4\u003eProduct Specification\u003c\/h4\u003e\u003cdiv class=\"responsive-table product-detail-table details-table\"\u003e\n\u003cbr\u003e\u003ctable style=\"width: 100%; height: auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eHost\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003eHuman\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eStability \u0026amp; Storage\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e\u003cp\u003e-80℃\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eBackground\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eThe reagent kit employs homogeneous time-resolved fluorescence technology (TR-FRET) for measuring the interaction between Human VCB (VHL\/Elongin-C\/Elongin-B Complex) and Human HIF-1α. The Tag2-Tracer is a fluorescently labeled HIF-1α peptide fragment. This method enables simple and rapid high-throughput screening of inhibitors and antibody blockers.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eAs shown in the figure, the interaction between VCB and Tracer is detected using a Eu-labeled anti-Tag1 antibody (TR-FRET donor) and an Acceptor-labeled SA (TR-FRET acceptor). Since the binding of VCB and Tracer brings the donor antibody and acceptor antibody into proximity, excitation of the donor antibody triggers fluorescence resonance energy transfer (FRET) to the acceptor antibody, resulting in a specific emission signal at 665 nm. VH032 can block the binding of VCB and Tracer, preventing the generation of FRET signals. The stronger the blocking effect of the screened drug on the VCB-Tracer interaction, the lower the signal. The signal is proportional to the degree of interaction between VCB and Tracer. No washing steps are required.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/c6fc677d-95f7-49ab-b09b-c1bec72d8cb3.png\" style=\"margin-left: 30px; max-width: 100%; height: auto; vertical-align: middle;\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eComponents\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003ctable border=\"1\" style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e组分\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd 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#000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eDetection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1 ×\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e3mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e14mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e70mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e240mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eProtocol\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003e1. Reagent Preparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.1 Before use, thaw all reagents at room temperature (room temperature equilibration for at least 30 min). The 384-well shallow well plate reaction system volume is 20 μL (reagent volumes for the reaction system are shown in the table); calculate the required volume before preparation and prepare as needed; the following preparation is for reference only, taking 500 times as an example.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTable 1. Reagent Preparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eReagent Name\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eVolume per Detection Well μL\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTag1-VCB protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan\u003eTake 20 μL 100 × Tag1-VCB protein stock solution, add to 1.98 mL 1×Detection buffer to dilute to 1×, mix and set aside.\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTag2-Tracer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan\u003eTake 20 μL 100 × Tag2-Tracer stock solution, add to 1.98 mL 1×Detection buffer to dilute to 1×, mix and set aside.\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eDetection Reagent Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eTake 50 μL 50× Eu-anti-Tag1 stock solution, add 2.45 mL 1×Detection buffer to dilute to 2.5 mL, mix;\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eTake 25 μL 100× SA-Ac stock solution, add 1×Detection buffer 2.475 mL to dilute to 2.5 mL, mix;\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eMix both 1:1, this is Detection Mix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.2 Gradient Dilution of Test Samples\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eTaking VH032 as an example, the diluent is 1× Detection buffer. To reduce the interference of matrix effects, it is recommended to use a solution with the same matrix as the test sample for dilution; and adjust the test samples according to actual concentration.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTable 2. \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ePositive Drug VH032 Gradient Dilution (Adjust According to Actual Situation)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eVH032 Prepared Concentration (nM)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eVH032 Final Concentration (nM)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation Method\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e①\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e30,000.0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e300,000.0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2μL 3mM Stock Solution + 18μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e②\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e10000.0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e100000.0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ① +20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e③\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e3333.3\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e33333.3\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ② +20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e④\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1111.1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e11111.1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ③ +20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑤\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e370.4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e3703.7\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ④ +20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑥\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e123.5\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1234.6\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑤ +20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑦\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e41.2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e411.5\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑥ +20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑧\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e13.7\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e137.2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑦ +20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑨\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e4.6\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e45.7\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑧ +20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eBlank\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0.0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e20μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003e2. Sample Addition and Controls\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.1 Sample Well (Sample): Add 2 μL test sample (gradient dilution), 4 μL Tag1-VCB protein working solution, 4 μL Tag2-Tracer working solution, 10 μL Detection Reagent Mix sequentially into the 384-well shallow well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.2 Maximum Signal Control: Add 2 μL Detection buffer, 4 μL Tag1-VCB protein working solution, 4 μL Tag2-Tracer working solution, 10 μL Detection Reagent Mix sequentially into the 384-well shallow well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.3 Negative Control (Negative control): Add 10 μL Detection buffer, 10 μL Detection Reagent Mix sequentially into the 384-well shallow well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eAfter adding all samples, centrifuge, seal the plate film, and incubate at room temperature for 2 hours.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e　\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eSample (Sample)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eMaximum Signal Control\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eNegative Control (NC)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eStep 1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2μL Test Sample\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2μL 1×Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"4\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL 1×Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4μL Tag1-VCB protein Working Solution\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eIncubate at Room Temperature 10 min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eStep 2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4μL Tag2-Tracer Working Solution\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL Detection Reagent Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eSeal plate with film, incubate at room temperature for 2h\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e3.\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eDetection\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eDetect on a microplate reader compatible with TR-FRET. Excitation light is 320\/340 nm, detect emission wavelengths of 620 nm and 665 nm.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e[Result Calculation]\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e1) Calculate Signal Value (Ratio): Fluorescence signal at 665 nm divided by fluorescence signal at 620 nm, then multiplied by 10000.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eRatio = (665\/620) ×10000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2) Calculate Net signal based on signal value:\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eNet signal = (Std-NC)\/NC×100\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e3) Calculate CV (%):\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eCV (%) = Standard Deviation\/Mean Ratio × 100%\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e[Data Example]\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eThe data below cannot replace data obtained from experiments, it is for demonstration purposes only; results may vary depending on the plate reader instrument.\u003c\/span\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg class=\"img img-fluid o_we_custom_image\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/product.template\/20992085\/5de11f0c-0bb4-4101-94bb-9d2ec47e2284.png?access_token=b07117e4-7211-4263-a785-a64035e93e1a\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cimg style=\"height:auto;margin-left:30px;max-width:100%;vertical-align:middle;\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/2c2b03a1-42f2-4ccb-b7e3-4f8ca73eff0f.emf\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eNote: Recommended Microplate (384-well plate, White, Shallow Well)\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e","brand":"UA BIOSCIENCE","offers":[{"title":"100T","offer_id":42332766306379,"sku":null,"price":730.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"500T","offer_id":42332766339147,"sku":null,"price":2180.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"2500T","offer_id":42332766371915,"sku":null,"price":8175.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"10000T","offer_id":42332766404683,"sku":null,"price":21800.0,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0590\/8375\/1499\/files\/AntBioImage_afc59942-5c8e-4bb6-ba17-01a74770fa02.png?v=1780633781","url":"https:\/\/www.antbioinc.com\/products\/unione-tr-fret-human-vcbvhl-complexbinding-kit-ua086119","provider":"AntBio","version":"1.0","type":"link"}