{"product_id":"unione-tr-fret-human-tslptslpr-binding-kit-ua086125","title":"UniOne® TR-FRET Human TSLP\/TSLPR Binding Kit","description":"\u003ch4\u003eProduct Specification\u003c\/h4\u003e\u003cdiv class=\"responsive-table product-detail-table details-table\"\u003e\n\u003cbr\u003e\u003ctable style=\"width: 100%; height: auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eHost\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003eHuman\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eStability \u0026amp; Storage\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e\u003cp\u003e-80℃\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eBackground\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eThe kit employs homogeneous time-resolved fluorescence (TR-FRET) technology to measure the interaction between TSLP and TSLPR. This method enables simple, rapid, and high-throughput screening of inhibitors and antibody blockers.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eAs shown in the figure, the interaction between TSLP and TSLPR is detected using Eu-labeled anti-Tag1 antibody (TR-FRET donor) and Ac-labeled anti-Tag2 antibody (TR-FRET acceptor). The binding of TSLP and TSLPR brings the donor and acceptor antibodies into proximity, allowing the excitation of the donor antibody to trigger fluorescence resonance energy transfer (FRET) to the acceptor antibody, resulting in a specific emission signal at 665 nm. The positive control drug Bosakitug blocks the binding of TSLP and TSLPR, preventing FRET signal generation. The stronger the blocking effect of the screened drug on TSLP-TSLPR interaction, the lower the signal. This specific signal is proportional to the degree of TSLP-TSLPR interaction. The homogeneous assay is simple to perform and requires no washing steps.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg class=\"img img-fluid o_we_custom_image\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/product.template\/20998837\/9aef3c9c-9913-4441-855a-5dfb4c9879d7.png?access_token=79433465-aa5e-44cf-a12c-d8ac76f1f85d\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eComponents\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003ctable border=\"1\" style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eComponent\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd 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style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1000μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4000μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eDetection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10×\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e400μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e40mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eProtocol\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003e1. Reagent Preparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.1 Thaw all reagents at room temperature before use (allow at least 30 min for equilibration). The reaction system for the 384-well shallow plate is 20 μL (reagent volumes are shown in the table below). Calculate the required volume before preparation. The following preparation is for reference only, using 500 reactions as an example.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTable 1. Reagent Preparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eReagent Name\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eVolume per Well (μL)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eDetection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan\u003eTake 2 mL of 10× Detection buffer, add 18 mL of deionized water, dilute to 1×, and mix well.\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e-\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTag1-TSLP protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan\u003eTake 20 μL of Tag1-TSLP protein stock, dilute to 2 mL with 1× Detection buffer, and \u003cstrong\u003emix well.\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTag2-TSLPR protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan\u003eTake 20 μL of Tag2-TSLPR protein stock, dilute to 2 mL with 1× Detection buffer, and \u003cstrong\u003emix well.\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eMix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eTake 50 μL of Anti-Tag1 Eu antibody stock, add 2.45 mL of 1× Detection buffer, and \u003cstrong\u003emix well;\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eTake 200 μL of Anti-Tag2 Ac antibody stock, add 2.3 mL of 1× Detection buffer, and \u003cstrong\u003emix well;\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eAfter dilution, mix Anti-Tag1 Eu antibody and Anti-Tag2 Ac antibody 1:1 and \u003cstrong\u003emix well.\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.2 Gradient Dilution of Test Samples\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eUsing Bosakitug as an example, the dilution buffer is 1× Detection buffer. To reduce matrix interference, it is recommended to use a solution with the same matrix as the test sample. Adjust the dilution based on the actual sample concentration.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTable 2. Gradient Dilution of Positive Control Bosakitug (adjust as needed)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eFinal Bosakitug Concentration (nM)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation Concentration (nM)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation Method\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e①\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e3 μL of 57.5 μM Bosakitug + 14.4 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e②\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e333.333\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e3333.333\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ① + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e③\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e111.111\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1111.111\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ② + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e④\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e37.037\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e370.370\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ③ + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑤\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:极center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e12.346\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e123.457\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ④ + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑥\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4.115\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e41.152\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ⑤ + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑦\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1.372\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e13.717\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ⑥ + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑧\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.457\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4.572\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ⑦ + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑨\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.152\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1.524\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ⑧ + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑩\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.051\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.508\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ⑨ + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑪\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.017\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.169\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5 μL of ⑩ + 10 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eBlank\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e15 μL of 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003e2. Sample Loading and Controls\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2.1 Sample loading order for test wells: 2 μL of test sample, 4 μL of Tag1-TSLP protein working solution, 4 μL of Tag2-TSLPR protein working solution, and 10 μL of mixed Mix, added sequentially to the 384-well shallow plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2.2 Maximum control: 2 μL of 1× Detection buffer diluent, 4 μL of Tag1-TSLP protein working solution, 4 μL of Tag2-TSLPR protein working solution, and 10 μL of mixed Mix, added sequentially to the 384-well shallow plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2.3 Negative control (NC): 10 μL of 1× Detection buffer + 10 μL of Mix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eAfter loading all samples, centrifuge, seal with plate film, and incubate at room temperature for 2 hours.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eMaximum Control\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eSample\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eNC\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eStep 1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2 μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1× Detection Buffer (with DMSO)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2 μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eGradient-diluted test sample\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"4\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10 μL of 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4 μL of Tag1-TSLP protein working solution\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eIncubate for 10 min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eStep 2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4 μL of Tag2-TSLPR protein working solution\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10 μL of Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eStep 3\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eSeal with plate film and incubate at room temperature for 2 h\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e3.\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eDetection\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eMeasure using a TR-FRET-compatible microplate reader. Excitation wavelength: 320\/340 nm; emission wavelengths: 620 nm and 665 nm.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e[Data Analysis]\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1) Calculate the signal ratio (Ratio): Divide the 665 nm fluorescence signal by the 620 nm signal and multiply by 10,000.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eRatio = (665\/620) × 10,000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2) Calculate the net signal:\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eNet signal = (Std - NC) \/ NC × 100\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e3) Calculate CV (%):\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eCV (%) = (Standard Deviation \/ Mean Ratio) × 100%\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e[Example Data]\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eThe following data is for illustration only and may vary depending on the plate reader used.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg class=\"img img-fluid o_we_custom_image\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/product.template\/20998837\/8f42be03-252d-440c-97f0-4b1845c7628e.png?access_token=87cc94e8-040e-43fa-9721-4e532eb35860\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\\n\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eNote: Recommended microplate (384-well, white, shallow-well plate)\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e","brand":"UA BIOSCIENCE","offers":[{"title":"100T","offer_id":42332770041931,"sku":null,"price":730.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"500T","offer_id":42332770074699,"sku":null,"price":2180.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"2500T","offer_id":42332770107467,"sku":null,"price":8175.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"10000T","offer_id":42332770140235,"sku":null,"price":21800.0,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0590\/8375\/1499\/files\/AntBioImage_3896fb86-f521-492d-a00a-91c72c43cf2f.png?v=1780633787","url":"https:\/\/www.antbioinc.com\/products\/unione-tr-fret-human-tslptslpr-binding-kit-ua086125","provider":"AntBio","version":"1.0","type":"link"}