{"product_id":"unione-tr-fret-human-pcsk9d347yldlr-assay-kit-ua086124","title":"UniOne® TR FRET Human PCSK9(D347Y)\/LDLR Assay Kit","description":"\u003ch4\u003eProduct Specification\u003c\/h4\u003e\u003cdiv class=\"responsive-table product-detail-table details-table\"\u003e\n\u003cbr\u003e\u003ctable style=\"width: 100%; height: auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eHost\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003eHuman\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eStability \u0026amp; Storage\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e\u003cp\u003e-80℃\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eBackground\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eThe kit utilizes homogeneous time-resolved fluorescence (TR-FRET) technology to measure the interaction between Human PCSK9(D347Y) and Human LDLR. PCSK9(D347Y) is a mutant form of PCSK9 with higher affinity for LDLR. This method enables simple, rapid, and high-throughput screening of inhibitors and antibody blockers.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eAs shown in the figure, the interaction between PCSK9(D347Y) and LDLR is detected using Eu-labeled anti-Tag1 antibody (TR-FRET donor) and Ac-labeled Tag2 antibody (TR-FRET acceptor). The binding of PCSK9(D347Y) to LDLR brings the donor and acceptor antibodies into proximity, allowing the excitation of the donor antibody to trigger fluorescence resonance energy transfer (FRET) to the acceptor antibody, resulting in a specific emission signal at 665 nm. Screened compounds, such as Pep 2-8, block the binding of PCSK9(D347Y) to LDLR, preventing FRET signal generation. The stronger the blocking effect of the screened compound, the lower the signal. The signal is proportional to the degree of interaction between PCSK9(D347Y) and LDLR. No washing steps are required.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg class=\"image_resized img img-fluid o_we_custom_image\" style=\"aspect-ratio:647\/582;width:55.21%;\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/product.template\/20998036\/f7f950f0-1148-438d-ab04-cef1e877d15f.png?access_token=fa60d4fb-f898-4480-bfc0-23866b7bd5de\" alt=\"\" width=\"647\" height=\"582\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eComponents\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003ctable border=\"1\" style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan 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style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4m\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eDetection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003emL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e14\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003emL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e60\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003emL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e240\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003emL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eProtocol\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003eHere is the translated content in English, preserving the original formatting:```markdown\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003e1. Reagent Preparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.1 Thaw all reagents to room temperature before use (allow at least 30 min for equilibration). The reaction system for 384-well plates is 20μL (reagent volumes are shown in the table below). Calculate the required volume before preparation and prepare accordingly. The following preparation is for reference only, using 500 reactions as an example.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTable 1. Reagent Preparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eReagent Name\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eVolume per Well (μL)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eSample Dilution\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan\u003eUse 1× Detection Buffer to dilute samples. If the sample stock is in DMSO, maintain consistent DMSO concentration in the system (≤2%).\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTag1-LDLR Protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan\u003eDilute 20μL Tag1-LDLR stock with 1× Detection Buffer to 2mL, mix well.\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTag2-PCSK9(D347Y) Protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cspan\u003eDilute 20μL Tag2-PCSK9(D347Y) stock with 1× Detection Buffer to 2mL, \u003c\/span\u003e\u003cstrong\u003emix well.\u003c\/strong\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eAntibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cspan\u003eDilute 50μL Anti-Tag1 Eu antibody with 2.45mL 1× Detection Buffer, \u003c\/span\u003e\u003cstrong\u003emix well;\u003c\/strong\u003e\u003cspan\u003e dilute 200μL Anti-Tag2 Ac antibody with 2.3mL 1× Detection Buffer, mix well. Combine Anti-Tag1 Eu and Anti-Tag2 Ac antibodies at 1:1 ratio to prepare Antibody Mix.\u003c\/span\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.2 Sample Gradient Dilution\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eUsing Pep 2-8 as an example, dilute with 1× Detection Buffer. To minimize matrix effects, use the same matrix as the sample. Adjust concentrations as needed.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTable 2. \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ePep 2-8 Preparation Table\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e (adjust as needed)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e \u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003ePep 2-8 Prep Conc. (nM)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eFinal Conc. (nM)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation Method\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e1\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1000000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e100000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e12μL 1mM Pep 2-8\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e2\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e333333.33\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e33333.33\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e6μL ① +12μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e3\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e111111.11\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e11111.11\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5μL ② +10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e37037.04\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e3703.70\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5μL ③ +10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e5\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e12345.68\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1234.57\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5μL ④ +10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e6\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4115.23\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e411.52\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5μL ⑤ +10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e7\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1371.74\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e137.17\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5μL ⑥ +10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e8\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e457.25\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e45.72\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5μL ⑦ +10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e9\u003c\/span\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e152.42\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e15.24\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e5μL ⑧ +10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eBlank\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003e2. Sample Loading \u0026amp; Controls\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.1 Test Samples: Add sequentially to 384-well plate—2μL gradient-diluted sample, 4μL Tag2-PCSK9(D347Y), 4μL Tag1-LDLR, 10μL Antibody Mix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.2 Blank Control (Blank): Replace sample with 2μL 1× Detection Buffer.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.3 Eu Control (NC): 10μL 1× Detection Buffer + 10μL Antibody Mix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eAfter loading, centrifuge, seal, and incubate at RT for 2 hours.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eTest Sample\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eBlank Control\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eEu Control (NC)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eStep 1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2μL gradient-diluted sample\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"5\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL 1× Detection Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e+10μL Antibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4μL Tag2-PCSK9(D347Y)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eSeal, centrifuge at 1000rpm for 1min,\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eincubate at RT for 10min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eStep 2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4μL Tag1-LDLR\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL Antibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eSeal, centrifuge at 1000rpm for 1min, incubate at RT for 120min, read plate\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e3.\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eDetection\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eMeasure using a TR-FRET-compatible microplate reader. Excitation: 320\/340nm; Emission: 620nm and 665nm.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e[Data Analysis]\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e1) Calculate Signal Ratio: (665nm\/620nm) ×10000.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eRatio = (665\/620) ×10000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2) Calculate Net Signal:\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eNet Signal = (Std-NC)\/NC×100\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e3) Calculate CV (%):\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eCV (%) = Standard Deviation\/Mean Ratio × 100%\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eRatio × 100%\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e[Example Data]\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eThe following data is illustrative and may vary based on instrumentation.\u003c\/span\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cimg class=\"image_resized\" style=\"aspect-ratio:672\/445;margin-left:30px;max-width:100%;vertical-align:middle;width:47.17%;\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/ae22ba3c-cf5c-4ae7-8d95-fef5b3386d69.png\" alt=\"\" width=\"672\" height=\"445\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eNote: Recommended microplate (384-well, white, shallow well)\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e```\u003c\/div\u003e","brand":"UA BIOSCIENCE","offers":[{"title":"100T","offer_id":42332767649867,"sku":null,"price":730.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"500T","offer_id":42332767682635,"sku":null,"price":2180.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"2500T","offer_id":42332767715403,"sku":null,"price":8175.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"10000T","offer_id":42332767748171,"sku":null,"price":21800.0,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0590\/8375\/1499\/files\/AntBioImage_2117aa95-f4f6-4242-aa13-4969adfc632c.png?v=1780633784","url":"https:\/\/www.antbioinc.com\/products\/unione-tr-fret-human-pcsk9d347yldlr-assay-kit-ua086124","provider":"AntBio","version":"1.0","type":"link"}