{"product_id":"unione-tr-fret-human-camp-hirange-detection-kit-ua086053","title":"UniOne® TR-FRET Human cAMP Hirange Detection Kit","description":"\u003ch4\u003eProduct Specification\u003c\/h4\u003e\u003cdiv class=\"responsive-table product-detail-table details-table\"\u003e\n\u003cbr\u003e\u003ctable style=\"width: 100%; height: auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eHost\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003eHuman\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eStability \u0026amp; Storage\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e\u003cp\u003e-80℃\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eBackground\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003eThe kit employs homogeneous time-resolved fluorescence (TR-FRET) technology, enabling precise measurement of cellular cAMP production. This method allows rapid detection of cAMP accumulation changes during the inhibition or activation of Gs or Gi signaling pathways.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003eAs shown in the figure, the Eu-labeled anti-cAMP antibody (TR-FRET donor) and the Ac-labeled cAMP (TR-FRET acceptor) bind directly. When the donor antibody and acceptor antibody are in proximity, excitation of the donor antibody triggers fluorescence resonance energy transfer (FRET) to the acceptor antibody, resulting in a specific 665 nm emission signal. When cAMP from cell samples or standard curves is present, it competes with the Ac-labeled cAMP for binding to the Eu-labeled anti-cAMP antibody, thereby reducing the FRET signal. This specific signal is inversely proportional to the extent of interaction between the Eu-labeled anti-cAMP antibody and the Ac-labeled cAMP. The homogeneous assay is simple to perform and requires no washing steps.\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e         \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e               \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/5dab6b12-1b41-452c-94f5-daee590d162b.jpeg\" style=\"margin-left:30px; width:640px; height:auto; vertical-align:middle;\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eComponents\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003ctable border=\"1\" style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid 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#000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003eStimulation Buffer (without IBMX)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e2mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e10mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e50mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e200mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003eNote: Aliquot immediately upon first thawing and store at the recommended temperature. Avoid storage after dilution and repeated freeze-thaw cycles.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eProtocol\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003eHere is the translated content in English, maintaining the original formatting:```html\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003e1. Reagent Preparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.1 Thaw all reagents to room temperature before use. The reaction system for the 384-well plate is 20μL (reagent volumes are shown in the table below). Calculate the required volume before preparation. The following preparation is for reference only, using 500 reactions as an example.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTable 1. Reagent Preparation and Volumes\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eReagent Name\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eVolume per Well (μL)\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eAnti-cAMP Eu antibody\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTake 25μL of Anti-cAMP Eu antibody stock, dilute to 2.5mL with Lysis \u0026amp; Detect Buffer, \u003cstrong\u003emix well for use.\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003ecAMP-Ac\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTake 25μL of cAMP-Ac stock, dilute to 2.5mL with Lysis \u0026amp; Detect Buffer, \u003cstrong\u003emix well for use;\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.2 Gradient Dilution of Test Samples\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003ePrepare according to experimental conditions. The following is for reference only.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eUsing cAMP calibrator as an example, the diluent is Stimulation Buffer. Adjust sample concentrations as needed.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eTable 2. cAMP Calibrator Preparation Table\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation Concentration (nM)\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eFinal Concentration (nM)\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003ePreparation Method\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e40,000.000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e10,000.000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1μL of 4mM stock + 99μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:极left;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e13,333.333\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e3,333.333\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ① + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e3\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e4,444.444\u003c\/span\u003e极left;\"\u0026gt;\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1,111.111\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ② + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1,481.481\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e370.370\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ③ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e5\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e493.827\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e123.457\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ④ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e6\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e164.609\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e41.152\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ⑤ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e7\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e54.870\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e13.717\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ⑥ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e8\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e18.290\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e4.572\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ⑦ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e9\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e6.097\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.524\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ⑧ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e10\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.032\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0.508\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ⑨ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e11\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0.677\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0.169\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ⑩ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e⑫\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0.226\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0.056\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp style=\"极left;\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e20μL of ⑪ + 40μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eBlank\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #极left;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e40μL of 1× Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1.3 Pre-Treatment for Cell-Based Experiments\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e①Stimulation Buffer is used for diluting cells and stimulating drugs. The Stimulation Buffer provided in the kit does not contain IBMX. Add an appropriate concentration of IBMX to prevent cAMP degradation, depending on experimental objectives.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e②Before formal experiments, optimize the number of cells per well and the incubation time with drugs based on cell and drug characteristics to ensure cAMP levels fall within the linear range of the calibration curve.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003e2. Sample Loading and Controls\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.1 cAMP Standard Curve: 5μL of gradient-diluted cAMP reference, 5μL Stimulation Buffer, 5μL Anti-cAMP Eu antibody working solution. Incubate for 10min, then add 5μL cAMP-Ac.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.2 Test Samples: 5μL of gradient-diluted sample, 5μL Stimulation Buffer, 5μL Anti-cAMP Eu antibody working solution. Incubate for 10min, then add 5μL cAMP-Ac.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.3 Cell-Based Experiments: Based on pre-experiment results, add 5μL cells and 5μL gradient-diluted drug per well. After incubation (optimized time), add 5μL Anti-cAMP Eu antibody working solution, incubate at room temperature for 10min, then add 5μL cAMP-Ac.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2.4 Negative Control (NC): 5μL Stimulation Buffer instead of sample or 5μL untreated cells.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\" border=\"1\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003ecAMP Standard Curve\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eTest Samples\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eCell Experiments\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eNegative Control (NC)\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"4\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eStep 1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL cAMP calibrator\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL test sample\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL cells\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL Stimulation Buffer or 5μL cells\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL Stimulation Buffer极left;\"\u0026gt;\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL drug※\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL Stimulation Buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"4\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL Anti-cAMP Eu antibody working solution\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"4\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eIncubate at room temperature for 10min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"2\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eStep 2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"4\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e5μL cAMP-Ac\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"4\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eSeal plate, centrifuge at 1000rpm for 1min to mix,\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eincubate at room temperature for 120min, then read plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e•\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eOptimize incubation time for cells and drugs experimentally. Add subsequent reagents after drug stimulation.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e3.\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eDetection\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eMeasure using a TR-FRET-compatible microplate reader. Excitation at 320\/340nm, emission at 620nm and 665nm.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e【Data Analysis】\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e1) Calculate signal ratio (Ratio): (665nm signal \/ 620nm signal) × 10000.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eRatio = (665\/620) × 10000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e2) Calculate CV (%):\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eCV (%) = (Standard Deviation \/ Mean Ratio) × 100%\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e【Example Data】\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003eThe following data is for illustration only and may vary depending on the reader.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg class=\"img img-fluid o_we_custom_image image_resized\" style=\"aspect-ratio:912\/891;width:50%;\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/product.template\/20293032\/5b496135-9e20-49dd-953b-4491d86a3b05.png?access_token=c249a5a1-aa9a-4df0-8759-dd3cb19ada08\" alt=\"\" width=\"912\" height=\"891\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#000000;\"\u003e\u003cstrong\u003eNote: *Example data only. Recommended plate: 384-well, white, shallow-well.\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e```\u003c\/div\u003e","brand":"UA BIOSCIENCE","offers":[{"title":"250T","offer_id":42332760834123,"sku":null,"price":470.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"1000T","offer_id":42332760866891,"sku":null,"price":1100.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"5000T","offer_id":42332760899659,"sku":null,"price":3000.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"20000T","offer_id":42332760932427,"sku":null,"price":7500.0,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0590\/8375\/1499\/files\/AntBioImage_017aec22-6883-45e6-9206-677099e5c697.png?v=1780633682","url":"https:\/\/www.antbioinc.com\/products\/unione-tr-fret-human-camp-hirange-detection-kit-ua086053","provider":"AntBio","version":"1.0","type":"link"}