{"product_id":"unione-tr-fret-human-btkcrbn-protac-binding-kit-ua086079","title":"Unione ®️ TR-FRET Human BTK\/CRBN PROTAC Binding Kit","description":"\u003ch4\u003eProduct Specification\u003c\/h4\u003e\u003cdiv class=\"responsive-table product-detail-table details-table\"\u003e\n\u003cbr\u003e\u003ctable style=\"width: 100%; height: auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eHost\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003eHuman\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eStability \u0026amp; Storage\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e\u003cp\u003e-80℃\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eBackground\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eThe assay kit utilizes homogeneous time-resolved fluorescence (TR-FRET) technology to measure the interaction between the DDB1\/CRBN complex and BTK mediated by molecular glue SJF620 and test compounds. This method enables a high-throughput format for simple and rapid detection of small molecules that can mediate the interaction between the DDB1\/CRBN complex and BTK.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eAs shown, the interaction between DDB1\/CRBN and BTK is detected using a Eu-labeled anti-Tag1 antibody (TR-FRET donor) and an Accepter-labeled anti-Tag2 antibody (TR-FRET acceptor). Since molecular glue SJF620 mediates the interaction between DDB1\/CRBN and BTK, the donor antibody and acceptor antibody come into proximity, allowing the excitation of the donor antibody to trigger fluorescence resonance energy transfer (FRET) to the acceptor antibody, resulting in a specific emission signal at 665 nm. This specific signal is proportional to the extent of interaction mediated by SJF620 between DDB1\/CRBN and BTK. The homogeneous assay is simple to perform and requires no washing steps.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e                                           \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/10183402-e97a-4597-8b19-a4b26f9fc349.png\" style=\"margin-left:30px; width:531px; height:auto; vertical-align:middle;\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eComponents\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003ctable border=\"1\" style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp 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style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e400μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e40mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eProtocol\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e[Experimental Procedure and Operation]\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e1\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e.\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eReagent Preparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e.1 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eMelt all reagents at room temperature before use (equilibrate at room temperature for at least 30 min). The reaction volume for the 384-well shallow well plate is 20\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμ\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eL (reagent volumes for the reaction system are shown in the table). Calculate the required volume for the experiment prior to preparation and prepare as needed; the following preparation is for reference only, using 500 tests as an example.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eTable 1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e. \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eReagent Preparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eReagent Name\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003ePreparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eVolume per Detection Well (μL)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eDetection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eTake\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 2 mL 10\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e Detection buffer 1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e and add\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 18 mL deionized water, di\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003elute\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e to\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 1×, mix\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e well and\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e set aside\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eSJF620\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eAccording to the reaction system, dilute the compound to the desired concentration using\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eEnsure consistent DMSO concentration across all detection wells\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eTag1-DDB1\/CRBN protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eTake\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 40\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag1-DDB1\/CRBN protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e stock solution, dilute to 2 mL with 1× Detection buffer,\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e mix well and set aside for later use.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eTag2- \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eBTK\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eTake\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 100\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag2- \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eBTK\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e stock solution, dilute to 2 mL with 1× Detection buffer,\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e mix well and set aside for later use.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eAntibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eTake\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 50μL Anti-Tag1 Eu antibody \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003estock solution, add\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 2.45 mL of 1× Detection buffer,\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003emix well;\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e take\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 200μL Anti-Tag2 Ac antibody \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003estock solution, add\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 2.3 mL of 1× Detection buffer,\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003emix well\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e;\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e mix the two solutions 1:1 to prepare Antibody Mix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp\u003e\u003cspan\u003e1.2 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eGradient Dilution of Test Samples\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eUsing SJF620 as an example, the diluent is 1× Detection buffer. To minimize matrix effect interference, it is recommended to dilute with a solution matching the sample matrix; adjust the test samples according to actual concentrations.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eTable\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e2. \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ePositive Control Drug Gradient Dilution\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e (Adjust according to actual conditions)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eSJF620 Final Concentration (nM)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eSJF620 Prepared Concentration (nM)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003ePreparation Method\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10000.00\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e100000.00\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1 mM\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e Stock Solution\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e+\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e18\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e2\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2500.00\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e25000.00\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e5\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e①\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e+\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e15\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid 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\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e②\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e+\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e15\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e156.25\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp 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Controls\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable border=\"1\" style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003ePositive Control Standard Curve\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eTest Samples\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eBlank\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eNC\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eGradient Diluted SJF620\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμ\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eGradient Diluted Test Samples\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd rowspan=\"4\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL 1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e+\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eAntibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"3\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4μL Tag1- CRBN protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"3\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4μL Tag2-\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eBTK \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eprotein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"3\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10μL Antibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"4\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eSeal the plate wells with a sealing film\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e,\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eincubate at room temperature for 2 hours;\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2.1 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTest Samples: 2μL gradient diluted test samples, 4μL Tag1-DDB1\/CRBN protein working solution, 4μL Tag2-\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eBTK \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eprotein working solution, 10μL mixed Antibody Mix (Tag2-\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eBTK \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eprotein can be mixed with Antibody Mix in proportion before addition), added sequentially into the 384-well shallow well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2.2 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e Positive Control Standard Curve: 2μL gradient diluted SJF620, 4μL Tag1-DDB1\/CRBN protein working solution, 4μL Tag2-\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eBTK \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eprotein working solution, 10μL Antibody Mix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e.3 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eBlank: 2μL 1× Detection buffer replaces test samples;\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2.4 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eNegative Control Wells (NC): 10μL 1× Detection buffer plus 10μL Antibody Mix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eAfter adding all samples, centrifuge, cover with a sealing film, and incubate at room temperature for 2 hours.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e3.\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eDetection\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eDetect using a microplate reader compatible with TR-FRET. Excitation wavelength is 320\/340nm, and emission wavelengths detected are 620nm and 665nm. \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e[Result Calculation]\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e1)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e Calculate Signal Value (Ratio): Divide the 665nm fluorescence signal by the 620nm fluorescence signal, then multiply by 10000.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eRatio\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e=\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e(665\/620)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e ×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e Calculate Net signal based on signal values:\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eNet signal\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e = (Std-\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eNC\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e)\/\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eNC\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×100\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e3)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e Calculate CV (%):\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eCV (%) = Standard Deviation\/Mean Ratio × 100%\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e[Data Example]\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eThe following data cannot replace data obtained from experiments and is for illustration only. Results may vary depending on the microplate reader used.\u003c\/span\u003e  \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/88659b1f-2bc4-402d-a705-621fe33d4dcb.png\" style=\"margin-left:30px; width:376px; height:auto; vertical-align:middle;\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eNote: Recommended microplate (384-well plate, white, shallow well)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e","brand":"UA BIOSCIENCE","offers":[{"title":"100T","offer_id":42332763258955,"sku":null,"price":730.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"500T","offer_id":42332763291723,"sku":null,"price":2180.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"2500T","offer_id":42332763324491,"sku":null,"price":8175.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"10000T","offer_id":42332763357259,"sku":null,"price":21800.0,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0590\/8375\/1499\/files\/AntBioImage_98d8c016-e576-4a57-b1ae-bc2a9c10ed0b.png?v=1780633722","url":"https:\/\/www.antbioinc.com\/products\/unione-tr-fret-human-btkcrbn-protac-binding-kit-ua086079","provider":"AntBio","version":"1.0","type":"link"}