{"product_id":"unione-tr-fret-human-brd4jq-1-binding-kit-ua086168","title":"UniOne® TR-FRET Human BRD4\/JQ-1 Binding Kit","description":"\u003ch4\u003eProduct Specification\u003c\/h4\u003e\u003cdiv class=\"responsive-table product-detail-table details-table\"\u003e\n\u003cbr\u003e\u003ctable style=\"width: 100%; height: auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eHost\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003eHuman\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eStability \u0026amp; Storage\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e\u003cp\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eBackground\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e【ASSAY PRINCIPLE】\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eThe kit is based on homogeneous time-resolved fluorescence technology (TR-FRET) technology，which is used to assess the interaction of RIPTAC and BRD4. \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eAs shown in the figure below, the interaction between BRD4 and JQ-1 was detected by an Eu-labeled anti-Tag1 antibody (TR-FRET donor) and an Ac-labeled SA (TR-FRET receptor). Since the molecular JQ-1 binding to BRD4, the donor antibody is in close proximity to the receptor antibody. Excitation of the donor antibody triggers fluorescence resonance energy transfer (FRET) to the receptor, resulting in specific emission of a signal at a wavelength of 665 nm from the receptor. This specific signal is proportional to the degree of interaction between BRD4 and JQ-1. While the RIPTAC molecular bind to BRD4 competing with JQ-1, resulting the specific emission of a signal at a wavelength of 665 nm from the receptor decreased. This decrease of specific signal is proportional to the degree of interaction between BRD4 and RAPTIC. This homogeneous assay is simple to perform and requires no washing steps.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/ec69de16-ff0c-46d1-8364-edaad13c87db.png\" style=\"margin-left:30px; width:553px; height:auto; vertical-align:middle;\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eComponents\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e【Composition and Storage Conditions】\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable border=\"1\" style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp 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solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eDetection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e20mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e100mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e400mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp\u003e\u003cspan\u003eNote: Aliquot into appropriate volumes, store at the recommended temperature and avoid repeated freeze-thaw cycle.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eProtocol\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e【Process and Operations】\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e1、Reagent Preparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e1.1 \u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eCompositions \u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eequilibration\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eBefore use, dissolve all reagents at room temperature (allow at least 30 minutes for temperature equilibration). For the 384-well plate assay, use 20 μL of reaction mixture (the reagent quantities are listed in the table below). Calculate the required volume prior to preparation accordingly. The following preparation steps are provided for reference only, using a 500-well plate as an example.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eTable 1. Reagent Preparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eComposition \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eConfiguration\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eμL\/well\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eTag1-BRD4 protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp\u003e\u003cspan\u003eTake 20 μL of the 100× \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag1-BRD4 protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003estock solution, add 1.98 mL of 1× Detection buffer to dilute it to 1× concentration, and mix thoroughly for later use.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eTag2-JQ-1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp\u003e\u003cspan\u003eTake 20 μL of 100× \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag2-JQ1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e, add it to 1.98 mL of 1× Detection buffer to dilute to 1× concentration, and mix thoroughly for later use.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eAntibody \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eMix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eTake 12.5 μL of the 200× \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eAnti-Tag1 Tb antibody\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e , add 2487.5 μL of 1× Detection buffer to dilute to 2.5 mL, and mix thoroughly; take 200 μL of the 12.5× \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eSA Ac\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e, add 2300 μL of 1× Detection buffer to dilute to 2.5 mL, and mix thoroughly; combine the two solutions in a 1:1 ratio to obtain the \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eAntibody \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eMix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e1.2 Gradient dilution of the sample \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eHLD0915 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eas an example, the dilution solution is 1× Detection buffer. To minimize interference from matrix effects, it is recommended to use a solution with the same matrix composition as the sample being tested; additionally, the sample concentration should be adjusted according to its actual situation.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eTable 2. \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eHLD0915 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003egradient dilution（Adjust according to the actual situation\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"color:#000000\"\u003e）\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eHLD0915 \u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003efinal concentration（nM）\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px 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style=\"font-weight:bold\"\u003eDilution\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e①\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp 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style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1μL 1000 μM \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eHLD0915\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e+99μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e②\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid 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#000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e40μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e2、Sample and control\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e2.1 Sample：\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eAdd 4 μL of \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag1-BRD4 protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e working solution, 4 μL of \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag2-JQ-1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e working solution, 2 μL of the gradient-diluted sample , and 10 μL of the mixed Antibody Mix sequentially into the 384-well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e2.2 \u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eHLD0915\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e:\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 4 μL of \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag1-BRD4 protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e working solution, 4 μL of \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag2-JQ-1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e working solution, 2 μL of gradient-diluted HLD0915, and 10 μL of the mixed Antibody Mix sequentially into the 384-well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e2.3 Blank：\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e4 μL of \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag1-BRD4 protein\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e working solution, 4 μL of \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag2-JQ-1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e working solution, 2 μL of Detection buffer, and 10 μL of the mixed Antibody Mix sequentially into the 384-well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e2.4 Negative control：\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e 10μL Detection buffer, and 10 μL of the mixed Antibody Mix sequentially into the 384-well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eAfter adding all samples, centrifuge, seal with a cover membrane, and incubate at room temperature for 2 hours.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eTable 3. \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eSample and control spotting proces\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003es\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eHLD0915\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eSample\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eBlank\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eNegative control (\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eNC)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003egradient-diluted HLD0915\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003egradient-diluted sample\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd rowspan=\"5\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10μL 1× Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eand 10μL Antibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"3\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4μL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag1-BRD4 protein\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"3\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eIncubate at room temperature for 10 mins\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"3\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4μL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eTag2-JQ-1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"3\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10μL Antibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd colspan=\"4\" style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eSeal the plate wells with a sealing film and incubate at room temperature for 2 hours.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e3、\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eRead Data\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eThe detection was performed on a TR-FRET microplate reader. The excitation wavelength was 320\/340 nm, and the emission wavelengths at 620 nm and 665 nm were detected.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e【DATA REDUCTION 】\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e1) Ratio：\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eRatio\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e=\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e(665\/620)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e ×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2) \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eNet signal\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e： \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eNet signal\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e = (Std-NC)\/NC×100\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eStd：the ratio of sample and control\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eNC: the ratio of \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003enegative control\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e3) CV（%）：\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003eCV（%）= Standard Deviation\/Mean Ratio × 100%\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e【Data Example】\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eThe following data cannot replace experimental results obtained in experiments; \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ethey \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eare provided solely for illustrative purposes, and outcomes may vary depending on the plate reader used.\u003c\/span\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/c04fa632-5035-47b3-a849-5e88deac53fe.png\" style=\"margin-left:30px; width:313px; height:auto; vertical-align:middle;\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/b289a812-d13e-4a13-85c0-0bd13fbf80ed.png\" style=\"margin-left:30px; width:285px; height:auto; vertical-align:middle;\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003eNote: Recommended microplate (384-well plate, white, shallow wells).\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e","brand":"UA BIOSCIENCE","offers":[{"title":"100T","offer_id":67435086020683,"sku":"UA086168-100T","price":730.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"500T","offer_id":67435086053451,"sku":"UA086168-500T","price":2180.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"2500T","offer_id":67435086086219,"sku":"UA086168-2500T","price":8175.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"10000T","offer_id":67435086118987,"sku":"UA086168-10000T","price":21800.0,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0590\/8375\/1499\/files\/AntBioImage_1fffd62a-a1bb-4981-9ecf-6bde243b57be.png?v=1794250811","url":"https:\/\/www.antbioinc.com\/products\/unione-tr-fret-human-brd4jq-1-binding-kit-ua086168","provider":"AntBio","version":"1.0","type":"link"}