{"product_id":"unione-tr-fret-human-brd4bd1h4-binding-kit-ua086143","title":"UniOne® TR-FRET Human BRD4（BD1）H4 Binding Kit","description":"\u003ch4\u003eProduct Specification\u003c\/h4\u003e\u003cdiv class=\"responsive-table product-detail-table details-table\"\u003e\n\u003cbr\u003e\u003ctable style=\"width: 100%; height: auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eHost\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003eHuman\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eStability \u0026amp; Storage\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e\u003cp\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eBackground\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e【\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003eASSAY PRINCIPLE\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e】\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eThe kit is based on homogeneous time-resolved fluorescence technology (TR-FRET) technology，which is used to assess the molecular-mediated interaction between the BRD4 (BD1) and the H4 peptide. This method provides a high-throughput approach to detect the small molecules capable of mediating the interaction between BRD4 (BD1) and H4 peptide simply and rapidly.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eAs shown in the figure below, the interaction between BRD4 (BD1) and H4 peptide was detected by an Eu-labeled anti-Tag1 antibody (TR-FRET donor) and an Ac-labeled anti-Tag2 antibody (TR-FRET receptor). The donor is in close proximity to the receptor antibody，excitation of the donor antibody triggers fluorescence resonance energy transfer (FRET) to the receptor antibody, resulting in specific emission of a signal at a wavelength of 665 nm from the receptor antibody. Since the molecular (+)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eJQ-1 block the interaction between BRD4 (BD1) and H4 peptide, \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ethe FRET signal is reduced.\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e This specific signal is proportional to the degree of interaction between BRD4\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e(\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eBD1)and H4 peptide. This homogeneous assay is simple to perform and requires no washing steps.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003e             \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/1ed1a1fa-e05f-4b92-81a8-cfdd67549457.png\" style=\"margin-left:30px; width:523px; height:auto; vertical-align:middle;\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eComponents\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold;color:#1655A5\"\u003e【Composition and Storage Conditions】\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable border=\"1\" style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid 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#000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eAnti-Tag\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e Ac antibody\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e12.5\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e40\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e200\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1m\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eDetection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003em\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003emL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003emL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e40\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003emL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e-80℃\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan\u003eNote: Aliquot into appropriate volumes, store at the recommended temperature and avoid repeated freeze-thaw cycle.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eProtocol\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e【Process and Operations】\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cstrong\u003e1、Reagent Preparation\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cstrong\u003e1.1 Compositions equilibration\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan\u003eBefore use, dissolve all reagents at room temperature (allow at least 30 minutes for temperature equilibration). For the 384-well plate assay, use 20 μL of reaction mixture (the reagent quantities are listed in the table below). Calculate the required volume prior to preparation accordingly. The following preparation steps are provided for reference only, using a 500-well plate as an example.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eTable 1. Reagent Preparation\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eComposition\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eConfiguration\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eμL\/well\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTag1-BRD4 (BD1)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan\u003eTake 20 μL of the 100× Tag1-BRD4 (BD1) stock solution, add 1.98 mL of Detection buffer to dilute it to 1× concentration, and mix thoroughly for later use.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTag2-H4 peptide\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan\u003eTake 20 μL of 100× Tag2-H4 peptide, add it to 1.98 mL of Detection buffer to dilute to 1× concentration, and mix thoroughly for later use.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eAntibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eTake 25 μL of the 100× Anti-Tag1 Eu antibody stock solution, add 2475 μL of Detection buffer to dilute to 2.5 mL, and mix thoroughly; take 200 μL of the 12.5× Anti-Tag2 Ac antibody stock solution, add 2300 μL of Detection buffer to dilute to 2.5 mL, and mix thoroughly; combine the two solutions in a 1:1 ratio to obtain the Antibody Mix.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cstrong\u003e1.2 Gradient dilution of the sample\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan\u003e(+) JQ-1 as an example, the dilution solution is Detection buffer. To minimize interference from matrix effects, it is recommended to use a solution with the same matrix composition as the sample being tested; additionally, the sample concentration should be adjusted according to its actual situation.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eTable 2. (+) JQ-1 gradient dilution（Adjust according to the actual situation）\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e \u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003e(+) JQ-1 final concentration（nM）\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003e(+) JQ-1 preparation concentration（nM）\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eDilution\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e①\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e300\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e3000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.5μL 500 μM (+)JQ1 + 82.85μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e②\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e100.00\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1000.00\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ① +20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e③\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e33.33\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e333.33\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ② +20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e④\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e11.11\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e111.11\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ③ +20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑤\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e3.70\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e37.04\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ④ +20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑥\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1.23\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e12.35\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑤ +20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑦\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.41\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4.12\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑥ +20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑧\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.14\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e1.37\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑦+20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑨\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.05\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.46\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑧+20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e⑩\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.02\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0.15\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL ⑨+20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eBlank\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e0\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e20μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cstrong\u003e2、Sample and control\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cstrong\u003e2.1 Sample：\u003c\/strong\u003e\u003cspan\u003eAdd 4 μL of Tag1-BRD4 (BD1) working solution, 4 μL of Tag2-H4 peptide working solution, 2 μL of the gradient-diluted sample , and 10 μL of the mixed Antibody Mix sequentially into the 384-well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cstrong\u003e2.2 (+) JQ-1 : \u003c\/strong\u003e\u003cspan\u003e4 μL of Tag1-BRD4 (BD1) working solution, 4 μL of Tag2-H4 peptide working solution, 2 μL of gradient-diluted (+) JQ-1\u003c\/span\u003e\u003cstrong\u003e \u003c\/strong\u003e\u003cspan\u003e, and 10 μL of the mixed Antibody Mix sequentially into the 384-well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cstrong\u003e2.3 Blank：\u003c\/strong\u003e\u003cspan\u003e4 μL of Tag1-BRD4 (BD1) working solution, 4 μL of Tag2-H4 peptide working solution,, 2 μL of Detection buffer, and 10 μL of the mixed Antibody Mix sequentially into the 384-well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cstrong\u003e2.3 Negative control：\u003c\/strong\u003e\u003cspan\u003e10μL Detection buffer, and 10 μL of the mixed Antibody Mix sequentially into the 384-well plate.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan\u003eAfter adding all samples, centrifuge, seal with a cover membrane, and incubate at room temperature for 2 hours.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eTable 3. Sample and control spotting process\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cfigure class=\"table\"\u003e\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;border:1px solid #000000;width:auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003e(+) JQ-1\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eSample\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eBlank\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"background-color:#8BAAD2;border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cstrong\u003eNegative control (NC)\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003egradient-diluted (+) JQ-1\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003egradient-diluted sample\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e2μL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eDetection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" rowspan=\"5\"\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL Detection buffer\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eand 10μL Antibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4μL Tag1-BRD4 (BD1)\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eIncubate at room temperature for 10min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e4μL Tag2-H4 peptide\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"3\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003e10μL Antibody Mix\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\u003ctd style=\"border:1px solid #000000;text-align:center;vertical-align:middle;\" colspan=\"4\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center;\"\u003e\u003cspan\u003eSeal the plate wells with a sealing film and incubate at room temperature for 2 hours.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\u003c\/figure\u003e\u003cp\u003e\u003cbr\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right:8px;\"\u003e3、\u003c\/span\u003e\u003cstrong\u003eRead Data\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eThe detection was performed on a TR-FRET microplate reader. The excitation wavelength was 320\/340 nm, and the emission wavelengths at 620 nm and 665 nm were detected.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e【DATA REDUCTION 】\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e1) Ratio：\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eRatio = (665\/620) ×10000\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e2) Net signal：\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eNet signal = (Std-NC)\/NC×100\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eStd：the ratio of sample and control\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003eNC: the ratio of negative control\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e3) CV（%）：\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e\u003cspan\u003eCV（%）= Standard Deviation\/Mean Ratio × 100%\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"color:#1655A5;\"\u003e\u003cstrong\u003e【Data Example】\u003c\/strong\u003e\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e\u003cspan\u003eThe following data cannot replace experimental results obtained in experiments; they are provided solely for illustrative purposes, and outcomes may vary depending on the plate reader used.\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg class=\"image_resized\" style=\"height:auto;margin-left:30px;vertical-align:middle;width:278px;\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/6207e499-89d8-4f2a-bdb2-fba3412c0ea9.png\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left;\"\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e \u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cimg class=\"image_resized\" style=\"height:auto;margin-left:30px;vertical-align:middle;width:317px;\" src=\"https:\/\/univ-pmc.oss-cn-shanghai.aliyuncs.com\/092b56ae-cd8e-4f9a-853a-3365750bae6c.png\" alt=\"\"\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cstrong\u003eNote: Recommended microplate (384-well plate, white, shallow wells).\u003c\/strong\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e","brand":"UA BIOSCIENCE","offers":[{"title":"100T","offer_id":42883379462219,"sku":"UA086143-100T","price":730.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"500T","offer_id":42883379494987,"sku":"UA086143-500T","price":2180.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"2500T","offer_id":42883379527755,"sku":"UA086143-2500T","price":8175.0,"currency_code":"USD","in_stock":true},{"title":"10000T","offer_id":42883379560523,"sku":"UA086143-10000T","price":21800.0,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0590\/8375\/1499\/files\/AntBioImage_00ffb860-806d-4db2-8d7d-23b68d107f8d.png?v=1783688690","url":"https:\/\/www.antbioinc.com\/products\/unione-tr-fret-human-brd4bd1h4-binding-kit-ua086143","provider":"AntBio","version":"1.0","type":"link"}