{"product_id":"baculovirus-immunostaining-rapid-titration-kit-ua079055","title":"Baculovirus Immunostaining Rapid Titration Kit","description":"\u003ch4\u003eProduct Specification\u003c\/h4\u003e\u003cdiv class=\"responsive-table product-detail-table details-table\"\u003e\n\u003cbr\u003e\u003ctable style=\"width: 100%; height: auto;\"\u003e\u003ctbody\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eSynonyms\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e杆状病毒滴度免疫染色法快速检测试剂盒\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"width: 22%;\"\u003e\u003cstrong\u003eStability \u0026amp; Storage\u003c\/strong\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"width: 78%;\"\u003e\u003cp\u003e\u003cspan\u003e干冰运输。试剂保存见“产品组成”表格。\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/tbody\u003e\u003c\/table\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eBackground\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e杆状病毒滴度免疫染色法快速检测试剂盒通过杆状病毒GP64抗体特异性识别感染细胞表面表达的GP64蛋白，实现对杆状病毒滴度的快速定量，检测全程仅需2-3天，而传统噬斑测定法和终点稀释法（TCID50）通常需要5-8天，且操作繁琐、对技术人员经验依赖度高、结果判读主观性强。相较于qPCR法，后者虽能在数小时内完成检测，但基于病毒核酸定量无法区分感染性与非感染性病毒；而本产品直接检测GP64蛋白，测定的是具有感染性的病毒滴度（IFU\/mL），结果更接近实际感染效率，为MOI精确计算提供更可靠的依据。\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e此外，本试剂盒采用了全新材质的覆盖层，不仅可以有效限制病毒通过培养基扩撒，同时覆盖层的粘度和传统的甲基纤维素相比大大降低，并且可在37℃保持液化状态，减少了覆盖层过热过粘对细胞的不利影响，具有使用简单，易于去除，有效降低人为误差的优点。本产品批间精密度高、重复性好，适用于AcMNPV型杆状病毒滴度测定，为杆状病毒表达系统的病毒定量及大规模生产提供了快速、精准的技术支撑。\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eComponents\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan\u003e杆状病毒快速滴度检测试剂盒组分和规格如下。按照实验步骤示例使用可以进行\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e100\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e次检测。\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003ctable style=\"border-collapse:collapse;width:auto;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\n\u003ctr\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e规格\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid 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style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e山羊血清（\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e）\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e1.5 mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px 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#000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e覆盖层（\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e）\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003e0.5 mL\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003ctd style=\"text-align:center;vertical-align:middle;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000;border:1px solid #000000\"\u003e\u003cp style=\"text-align:center\"\u003e\u003cspan\u003eRT\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\u003c\/td\u003e\n\u003c\/tr\u003e\n\u003c\/table\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eProtocol\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e1、\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e试剂准备：\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e1)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e4%\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e多聚甲醛溶液：称取\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e4g\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e多聚甲醛于玻璃烧杯中，加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e50mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e蒸馏水中，在通风橱内用磁力搅拌器将温度升至\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e60\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃（不超过\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e65\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃），边搅拌边加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e30\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e~\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e50 \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e的\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eN\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e氢氧化钠以中和溶液，用\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003epH\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e试纸检测所得\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003epH\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e值，最终\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003epH\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e值应为\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003epH 6\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e~\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e8\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e，待溶液冷却，加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e50mL 0.2M\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e磷酸钠溶液\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e(pH 7.4)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e稀释，最终\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003epH\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e值应为\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e7\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e~\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e8\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e，必要时调整。使用\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e0.45μm\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e滤膜过滤，分装后储存于–\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e20\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃，使用前从–\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e20\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃取出并恢复至室温\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e2)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ePBST\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e溶液\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e: \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e称取\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eNa2HPO4 1.42g\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eKH2PO4 0.24g\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eKCl 0.2g\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eNaCl 8g\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e至烧杯中，加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e800mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e超纯水，待全部溶解后，加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e0.5 mL Tween 20\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e，搅拌均匀，用超纯水定容至\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1L\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e3)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e山羊血清：将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e山羊血清用\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ePBST\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e溶液稀释\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e倍\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e4)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e小鼠\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eGP64\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e抗体：将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1000×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e小鼠\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eGP64\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e抗体用\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e山羊血清稀释\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1000\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e倍\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e5)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e山羊抗小鼠抗体\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e-HRP\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e：将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1000×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e山羊抗小鼠抗体\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e-HRP\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e用\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e山羊血清稀释\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1000\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e倍\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e、杆状病毒感染：\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e1)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e在\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e96\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孔细胞培养板的一行（\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e12\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孔）接种处于对数生长期早期的\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eSf9\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e细胞（每孔\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e6.5\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e~\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e7\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e个细胞）\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e2)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e培养板于\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e28\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e\u0026gt;2hr\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e或孵育过夜\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:justify\"\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e3)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e取\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e50μL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e病毒样品用培养基作为稀释液制备病毒梯度稀释样品。稀释范围根据需要调整，各稀释梯度间充分混匀。本说明以病毒样品稀释度分别为\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e、\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e5\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e和\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e6\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e为例，该稀释范围适用于滴度为\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e6\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e至\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e9\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eIFU\/mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e的病毒样品\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e4)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e小心吸出培养基，注意避免刮擦孔底细胞\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e5)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e向相应孔中加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e25\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμ\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e病毒稀释\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e样品\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e（\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e稀释\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e样品\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e取\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e3\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孔，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e5\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e和\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003csup\u003e\u003cspan\u003e6\u003c\/span\u003e\u003c\/sup\u003e\u003cspan\u003e稀释\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e样品\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e各取\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孔），阴性对照孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e25μL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e培养基，轻振培养板使病毒均匀分布\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e6)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e将培养板用封口膜封口，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e28\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1hr\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e7)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e提前\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e15min\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e覆盖层与\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eSf9\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e细胞完全\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e培养基于\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e37\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃水浴预热\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e8)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e吸出接种物，避免刮取孔底细胞，将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e覆盖层用\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eSf9\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e细胞完全\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e培养基稀释成\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e覆盖层，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e每孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e50 μL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e的\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e覆盖层，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e用封口膜封口，于\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e28\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e43\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e-\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e48hr\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan\u003e \u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"text-align:left\"\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e3\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e、杆状病毒滴度检测：\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e1)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e150\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e的\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e4%\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e多聚甲醛（需提前\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e恢复至室温\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e）小心加入含覆盖层的各孔中，室温孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e30min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e2)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e弃去孔中液体，将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e96\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孔板\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e在纸巾上轻拍，每孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e200\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ePBST\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e溶液，洗涤\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e3\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e~\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e4\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e次，每次在振荡器上低速振板孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e5min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e3)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e每孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e50\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e的\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e山羊血清，室温，振荡器上低速振板孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e20min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e4)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e弃去孔中液体，将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e96\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孔板\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e在纸巾上轻拍，\u003c\/span\u003e\u003cspan style=\"font-weight:bold\"\u003e无需洗涤\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e，每孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e25\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL 1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e小鼠\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eGP64\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e抗体，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e37\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e25min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e5)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e弃去孔中液体，将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e96\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孔板\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e在纸巾上轻拍，每孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e200\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ePBST\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e溶液，洗涤\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e2\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e次，每次在振荡器上低速振板孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e5min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e6)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e每孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e50\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL 1\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e山羊抗小鼠抗体\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e-HRP\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e，\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e37\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e℃孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e25min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e7)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e弃去孔中液体，将\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e96\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e孔板\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e在纸巾上轻拍，每孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e200\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL \u003c\/span\u003e\u003cspan\u003ePBST\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e溶液，洗涤\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e3\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e次，每次在振荡器上低速振板孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e5min\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e8)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e每孔加入\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e50\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eμL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e显色底物（需提前\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e恢复至室温\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e），在室温下孵育\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e1.5-3hr\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e。加入显色底物后最快\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e10min\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e即可获得病毒滴度的初步结果，但准确性较低\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e9)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e显微镜下对各孔感染灶（蓝紫色细胞团）进行计数\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003cp\u003e\u003cspan style=\"margin-right: 8px;\"\u003e10)\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e以含\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e5\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e~\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e25\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e个感染灶的稀释度为准计算病毒滴度：病毒滴度（\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003eIFU\/mL\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e）\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e=\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e每孔平均病灶数×稀释倍数×\u003c\/span\u003e\u003cspan\u003e40\u003c\/span\u003e\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e\u003ch4\u003eGuidelines\u003c\/h4\u003e\u003cdiv\u003e\n\u003cp style=\"margin-bottom: 0px;\"\u003e  不同批次不建议混用\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"margin-bottom: 0px;\"\u003e 非经严格验证，不建议改变检测试剂用量\u003c\/p\u003e\n\u003cp style=\"margin-bottom: 0px;\"\u003e 仅限科研用途\u003c\/p\u003e\n\u003c\/div\u003e","brand":"UA 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